這些因素或?qū)е隆凹訇枴⒓訇帯保鹿诜揽乩魅绾胃珳?- OFweek醫(yī)械科技網(wǎng)

這些因素或?qū)е隆凹訇枴⒓訇帯保鹿诜揽乩魅绾胃珳?/p>

2021-11-04 14:54

作為新冠疫情防控利器，核酸檢測也面臨著“假陽性”或者“假陰性”的困擾。如何保證新冠核酸檢測的質(zhì)量，成為必須面對的問題。

雖然新冠核酸檢測假陽性是正常屬性，但如何盡可能減少“假陽性”，一直受到高度重視。

在新冠核酸檢測中，有做了N次檢測才陽性的情況；也有檢測“陽性”，全民動員找密接者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)是實驗室污染導致的“假陽性”。

例如，9月23日，江蘇省徐州市衛(wèi)健委在途經(jīng)徐州東站的G362／G359次列車上（為同一趟列車不同編號，西安－徐州－南京－無錫－蘇州－上海虹橋），發(fā)現(xiàn)1名乘客新冠病毒核酸檢測結(jié)果“陽性”。徐州市有關(guān)部門接報后迅速開展現(xiàn)場調(diào)查處置，使用負壓救護車將其轉(zhuǎn)運至定點收治醫(yī)院；對排查出的176名密切接觸者全部進行集中隔離醫(yī)學觀察和核酸檢測；對相關(guān)場所和環(huán)境進行了徹底的終末消毒。進而多地展開防控行動，如揚州發(fā)布當即緊急尋人信息等。不過，最終復核信息顯示：初步判斷該樣本因在第三方檢測機構(gòu)實驗室受到質(zhì)控品污染而導致“陽性”。

“假陽性的存在，會導致新冠防控成本增加，也影響民眾的正常生活。”一位核酸診斷試劑的專家表示。

那么，究竟是什么因素導致核酸檢測“不夠靠譜”？

在10月30日的國務院聯(lián)防聯(lián)控新聞發(fā)布會上，國家衛(wèi)生健康委醫(yī)政醫(yī)管局監(jiān)察專員郭燕紅表示，核酸檢測對于疫情防控發(fā)揮著重要作用，因此，提高核酸檢測能力和加強質(zhì)量控制至關(guān)重要。制定完善相應的技術(shù)規(guī)范、開展核酸檢測人員的培訓，同時強化室內(nèi)質(zhì)控和質(zhì)間評價，要求各個實驗室都要做好室內(nèi)質(zhì)量控制，每一批檢測都至少要有弱陽性和陰性的質(zhì)控品投放到臨床樣品當中，一起參與提取和擴增，通過室內(nèi)的質(zhì)控工作加大實驗室每批次核酸檢測的質(zhì)量管理。

“從今年年初到目前，已經(jīng)開展了9批次室間質(zhì)評工作，室間質(zhì)評結(jié)果都進行反饋，對于不合格的機構(gòu)也都進行整改。通過室間質(zhì)評，質(zhì)評的結(jié)果合格率都保持在98．5％以上。”郭燕紅表示。

不過，高達98．5％的合格率也無法避免假陽性的出現(xiàn)。出現(xiàn)假陽性的原因是什么？“主要是因為實驗室擴增階段的污染導致。”一位業(yè)內(nèi)專家表示。目前主流熒光PCR法，其陽性質(zhì)控物等擴增產(chǎn)物若處理不當極易形成氣溶膠污染實驗環(huán)境從而導致“假陽性”檢測結(jié)果，且短期內(nèi)很難清除。

“目前，對于陽性樣本，我們都需要進行復核，復核的過程一般是通過更換不同的試劑，但目前新冠試劑大多都采用相同的引物探針序列，擴增區(qū)域大同小異，實際上也不能很好解決擴增產(chǎn)物污染問題。建議選用非PCR方法，比如RNA恒溫擴增方法。該方法原理與PCR不同，只能從RNA開始擴增，PCR產(chǎn)生的DNA擴增產(chǎn)物對其沒有影響，因此可以用其對PCR結(jié)果進行驗證，排除PCR擴增產(chǎn)物的干擾。

國家衛(wèi)生健康委聯(lián)防聯(lián)控機制5月14日發(fā)布的《關(guān)于印發(fā)新型冠狀病毒肺炎防控方案（第八版）的通知》稱，新冠病毒核酸檢測方法主要是實時熒光RT－PCR方法，此方法含有兩個靶點，ORF1ab與核殼蛋白N。在病例確認上規(guī)定：實驗室確認陽性病例需滿足以下兩個條件中的一個：條件一，同一份標本中新冠病毒2個靶標（ORF1ab、N）實時熒光RT－PCR檢測結(jié)果均為陽性。如果出現(xiàn)單個靶標陽性的檢測結(jié)果，則需要重新采樣，重新檢測；條件二，兩種標本實時熒光RT－PCR同時出現(xiàn)單靶標陽性，或同種類型標本2次采樣檢測中均出現(xiàn)單個靶標陽性的檢測結(jié)果，可判定為陽性。

很多專家認為，“靶標多”可能是導致“假陽性”和“假陰性”的原因之一。

“靶子越多，越容易命中，這是個生活中的常規(guī)邏輯，但涉及到科學技術(shù)細節(jié)，事實并非如此。核酸檢測是一個復雜而精密的生物學過程，需要檢測的靶標越多，用到的原料越復雜，相互干擾也越大，會影響靈敏度，導致‘假陰性’。靶標越多，擴增出DNA產(chǎn)生污染的概率也越大，出現(xiàn)‘假陽性’的可能性也就大了。所以，檢測用雙靶，脫靶或誤傷的情況也會增加。”一位新冠核酸診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)的負責人表示。

國家衛(wèi)健委臨床檢驗中心和FIND（世衛(wèi)組織創(chuàng)新診斷基金會）的評價結(jié)果顯示：單靶標試劑與雙靶標試劑性能相比，具有更高靈敏度；單靶標試劑對陽性樣本的檢出率要高于雙靶標試劑。

WHO發(fā)布的疑似病例檢測的實驗室指南也指出，在新冠病毒流行地區(qū)，檢測一個特異性靶標已足夠。