NADP+是DNA損傷應(yīng)答和腫瘤抑制中的內(nèi)源性PARP抑制劑

2019-06-05 08:48

文章背景簡(jiǎn)介

BACKGROUND INTRODUCTION

BRCA1和BRCA2在同源重組（HR）修復(fù)中起著不可或缺的作用，PARP抑制劑可特異性殺死含有BRCA1和BRCA2基因突變的腫瘤細(xì)胞。在過(guò)去幾年中，美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)了三種類(lèi)型的PARP抑制劑，包括olaparib，rucaparib和niraparib，用于BRCA1和BRCA2突變的乳腺癌，卵巢癌和前列腺癌。然而，最近的臨床試驗(yàn)表明，并非所有BRCA1／2突變的腫瘤都能有效地對(duì)PARP抑制劑治療產(chǎn)生反應(yīng)。矛盾的是，PARP抑制劑可有效治療BRCA1／2缺陷或HR途徑缺陷的的癌癥。因此，PARP抑制劑不僅能治療與BRCA突變型細(xì)胞，其他因素也可能影響的細(xì)胞敏感性。為了擴(kuò)展PARP抑制劑在癌癥治療中的潛力，我們探究了PARP抑制劑治療卵巢癌的預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物NADP＋。NAD＋是ADP－核糖基化的供體，并且NAD＋在NADK酶的作用下可以轉(zhuǎn)化成NADP＋。

2018年12月，美國(guó)希望之城國(guó)家醫(yī)療中心（City of Hope National Medical Center） Chunjing Bian等人在《Nature Communications》雜志（IF＝12．41）發(fā)表了題為“NADP＋ is an endogenous PARP inhibitor in DNA damage response and tumor suppression”的文章。本研究發(fā)現(xiàn)NADP＋（NAD＋的衍生物）是ADP－核糖基化的內(nèi)源性抑制劑，具有較高水平的NADP＋的腫瘤細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑治療過(guò)敏。

所用到的主要方法

METHODS

1．卵巢癌細(xì)胞系構(gòu)建

2．MTT測(cè)定

3．重組PARP蛋白的表達(dá)和純化

4．體外PARP活化測(cè)定

5．彗星試驗(yàn)

6．純化細(xì)胞PAR和斑點(diǎn)印跡

文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

ADP－核糖基化是由NAD＋作為ADP－核糖供體，并由聚（ADP－核糖）聚合酶（PARP）催化翻譯后的獨(dú)特的修飾。PARPs在DNA損傷修復(fù)中起著不可或缺的作用，小分子PARP抑制劑已成為有效的抗癌藥物。然而，迄今為止，PARP抑制劑治療僅限于患者BRCA1／2突變相關(guān)的乳腺癌和卵巢癌。將PARP抑制劑的治療潛力擴(kuò)展到其他癌癥類(lèi)型的主要挑戰(zhàn)之一是缺乏可預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物。本研究表明具有更高水平的NADP＋（NAD＋衍生物）的卵巢癌細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑更敏感。我們證明了NADP＋在體內(nèi)和體外都起著負(fù)調(diào)控和抑制ADP－核糖基化的作用。NADP＋可損害ADP－核糖基化依賴(lài)的DNA損傷修復(fù)，并使腫瘤細(xì)胞對(duì)化學(xué)合成的PARP抑制劑敏感。總之，本研究將NADP ＋鑒定為可能對(duì)癌癥治療有影響的內(nèi)源性PARP抑制劑。